sábado, 8 de mayo de 2010

Discusión Eq 1 Prac 5 Cinetica Enz






En la práctica se analizó la absorbancia de DOPA que tuvieron cada uno de los tubos, los cuales contenían diferente cantidad de amortiguador de fosfato 0.1 M y solución de L-DOPA.
Además de calculó la masa de DOPA, la concentración de sustrato y la velocidad.

En la tabla 1 se puede ver la absorbancia de cada uno de los tubos en intervalos de 10 segundos y nos dio que los tubos 5 y 6 fueron los de mayor absorbancia de DOPA, pues fueron a los tubos que se les puso la mayor cantidad de L-DOPA, teniendo 1.25 ml el tubo 5, y 1.5 ml el tubo 6.
En las gráficas 1 y 2 observamos cómo fue siendo la absorbancia de DOPA y su regresión lineal.
Vemos como el tubo 1 tiene una absorbancia 0, pues no tenía nada de L-DOPA, se le vertió puro amortiguador de fosfato 0.1 M.
Con forme se le fue añadiendo la solución L-DOPA, el grado de absorbancia fue siendo mayor, hasta llegar a 0.51 en el tubo 6 a los 90 segundos.

En la tabla 2 se pueden ver los resultado obtenidos después de hacer los cálculos para sacar la masa, concentración, pendientes, velocidad, y así poder hacer las gráficas requeridas para la cinética.
La Gráfica 3 nos da la velocidad que tuvo la reacción en función de la concentración del sustrato en mM. Vemos como la velocidad va aumentando pero al llegar a cierto punto en que la concentración también aumenta, la velocidad disminuye. Esto se debe a que en las reacciones enzimáticas, llega un momento en el cual la velocidad llega a un tope, y es cuando se dice que está saturada la enzima.

La Gráfica 4 es la representación gráfica de Lineweaver-Burk, relacionando 1/v por 1/s, la cual permite identificar el Km y Vmax.
Entonces se sacó la velocidad máxima y nos dio que es de 0.0747 Mm/min, y así también se sacó la Km, dándonos un resultado de 5.6493 mM.

En la Gráfica 5 se d ala representación de gráfica de Eadie Hofstee, la cual relaciona la velocidad de la reacción con la concentración del sustrato. Calculando dio una velocidad máxima de 0.0476 Mm/min y un Km de 2.8281 mM.
El digrama Eadie-Hofstee está menos afectada por el margen de error que el diagrama de Lineweaver-Burke, debido a que asigna el mismo peso a todos los puntos para cualquier rango de concentración del sustrato o de la velocidad de reacción, por lo que debemos de hacerle más caso a los resultados obtenidos por este método que por el de Lineweaver-Burke.
Fijándonos en la Gráfica 3 se ve como la velocidad más máxima a la que llega la reacción si concuerda con los datos obtenidos por el método de Eadie Hofstee.

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